BioRad伯樂T100梯度PCR儀作為一款高性能的PCR設(shè)備，其運行需要以下耗材和試劑，具體分類如下：

一、核心耗材

1、PCR管/板

0.2mL薄壁PCR管：需與儀器適配（如BioRad推薦規(guī)格），確保熱傳導(dǎo)效率。

8聯(lián)管或96孔PCR板：兼容T100的模塊規(guī)格，注意是否需使用透明或半透明蓋膜。

封板膜/ adhesive seals：用于96孔板密封，防止蒸發(fā)和污染。

2、離心管/吸頭

微量移液器吸頭（無核酸酶）：用于試劑分裝，避免交叉污染。

1.5mL離心管：配制主混合液（Master Mix）時使用。

二、必需試劑

1、PCR反應(yīng)組分

DNA模板：待擴增的核酸樣本。

引物（Primers）：特異性引物對，設(shè)計需符合實驗需求。

dNTPs：脫氧核苷酸三磷酸（dATP、dTTP、dCTP、dGTP），提供合成原料。

DNA聚合酶：如Taq酶、高保真酶（如BioRad的iProof™），需匹配實驗類型（常規(guī)/高保真）。

MgCl?溶液（若酶需要）：部分聚合酶需額外添加鎂離子。

緩沖液（Buffer）：通常隨酶提供，含pH穩(wěn)定劑和鹽離子。

2、添加劑（可選）

增強劑：如BSA、DMSO、甜菜堿（Betaine），用于復(fù)雜模板（如GC-rich序列）。

染料：如SYBR Green（qPCR時使用），若需實時監(jiān)測擴增。

三、輔助耗材

1、清潔與維護

無水乙醇或異丙醇：清潔PCR儀熱蓋和模塊。

無絨拭布：擦拭模塊，避免殘留。

去離子水：校準(zhǔn)溫度時可能需要（參考儀器手冊）。

2、防污染工具

RNase/DNase-free離心管和吸頭：防止核酸降解。

紫外線燈或核酸清除劑（如DNA-OFF™）：處理潛在污染。

四、注意事項

1、兼容性驗證：確保耗材（如PCR板）與T100的加熱塊規(guī)格匹配，避免熱傳導(dǎo)不均。

2、無核酸酶環(huán)境：所有耗材需為無核酸酶級別（如認證的PCR Clean產(chǎn)品）。

3、梯度PCR優(yōu)化：若使用梯度功能，需驗證不同退火溫度對試劑的影響。