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艾本德5430 R 是一款通量高、通用性強的緊湊型高速冷凍離心機,是高校生命科學、醫學、化學等實驗室處理常規至關鍵樣本的儀器。它結合了高達30,000 x g的相對離心力、制冷系統和靈活的轉子系統,能夠滿足絕大多數日常離心需求。以下是其典型的使用案例分類:
一、分子生物學實驗
這是5430 R最核心的應用領域,幾乎貫穿所有分子生物學實驗流程。
1、質粒DNA提取
步驟: 在堿裂解法提取質粒的多個步驟中都需要離心。
使用場景:
菌體收集: 將過夜培養的菌液離心(~5,000-12,000 xg),沉淀細菌。
沉淀質粒DNA: 在加入乙醇或異丙醇后,高速離心(~12,000-15,000 xg)使質粒DNA成團沉淀。
優勢: 制冷功能至關重要,可以防止實驗過程中樣本因產熱而降解,確保質粒的完整性和得率。
2、總RNA/DNA提取
步驟: 使用TRIzol等試劑提取RNA時,在分相和沉淀RNA步驟需要高速冷凍離心。
使用場景:
相分離: 離心(~12,000 xg)使樣品分層為有機相和水相。
RNA沉淀: 離心(~12,000 xg)沉淀RNA。
優勢: RNA極易被RNA酶降解,而低溫是抑制酶活的關鍵。 5430 R的精準溫控(通常設置為4°C)是成功提取完整RNA的保障。
3、PCR產物純化、酶切反應終止與沉淀
步驟: 在PCR反應后或酶切反應后,經常需要離心來快速收集液滴、沉淀核酸或回收純化產物。
使用場景: 使用離心柱純化試劑盒時,需要多次短時高速離心(~10,000-15,000 xg)來結合、清洗和洗脫DNA。
優勢: 通量高,一次可以處理多達48個甚至更多的樣本(使用合適的轉子),非常適合高通量克隆篩選等實驗。
二、細胞生物學與生物化學實驗
1、細胞培養
步驟: 細胞傳代、收集細胞或更換培養基。
使用場景:
細胞傳代: 離心(~300-500 xg)沉淀細胞,去除舊的培養基,加入新的培養基重懸。
收集細胞: 用于后續的蛋白提取、RNA提取或流式分析。
優勢: 溫和的加速/減速曲線(例如,Soft加速/減速功能)可以保護脆弱的哺乳動物細胞不被損傷,保持細胞活性。
2、蛋白質樣品制備
步驟: 從細胞或組織中提取蛋白質。
使用場景:
去除細胞碎片: 細胞裂解后,通過高速冷凍離心(~12,000-16,000 xg)去除不溶性細胞碎片和核物質,收集上清(總蛋白)。
沉淀蛋白質: 使用丙酮濃縮蛋白質。
優勢: 低溫離心是防止蛋白質變性和降解的必要條件。
三、 微生物學實驗
1、細菌/酵母菌體收集
步驟: 濃縮大量培養的微生物,用于后續研究。
使用場景: 離心(~5,000-8,000 xg)收集對數生長期或穩定期的菌體,用于提取基因組DNA、質粒或代謝產物。
優勢: 處理量大,可以使用大容量的角轉子或吊籃轉子。
2、去除培養基中的微生物
步驟: 無菌過濾前的預處理。
使用場景: 對于含有少量微生物的樣品,可以先通過離心初步去除大部分菌體。
四、總結與核心優勢
通過以上案例,我們可以總結出艾本德5430 R在高校實驗室中如此受歡迎的原因:
1、功能全面: 覆蓋了從低速的細胞離心到高速的核酸/蛋白沉淀,滿足了絕大多數實驗室的日常需求。
2、溫控精準可靠: 制冷功能是處理對溫度敏感的生物樣本(如RNA、蛋白質、活細胞)的剛需,保證了實驗結果的重復性和可靠性。
3、高通量與靈活性: 配備多種轉子(角轉子、水平轉子、酶標板轉子等),可以兼容從0.2 mL PCR管到50 mL錐形離心管、甚至酶標板等多種規格的樣本,實現“一機多用"。
4、操作簡便與安全: 直觀的數字控制、快速制冷、Short-spin(瞬時離心)功能以及可靠的蓋鎖安全機制,使其成為一款用戶友好且安全的設備。
總而言之,艾本德5430 R是高校實驗室中處理常規但關鍵的生物樣本制備任務的理想選擇,其穩定性和通用性使其成為許多實驗室公共平臺上基礎設備。