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Bio-Rad伯樂CFX Opus Deepwell實時熒光定量PCR系統(tǒng)能否24小時運行的問題,答案是:可以,這正是其實驗室自動化工作流程和連續(xù)運行能力的設(shè)計目標(biāo)之一。以下是詳細的解釋和需要注意的關(guān)鍵點:
一、伯樂CFX Opus Deepwell實時熒光定量PCR儀系統(tǒng)的設(shè)計支持長時間運行
1、硬件可靠性:CFX Opus系列是Bio-Rad的旗艦型qPCR儀器,專為高通量、高強度實驗室工作設(shè)計。其核心部件(如光學(xué)檢測系統(tǒng)、溫控模塊)均經(jīng)過嚴格測試,能夠支持長時間連續(xù)運行。
2、深孔板規(guī)格:Deepwell型號專門針對標(biāo)準96孔深孔板優(yōu)化,這類實驗通常樣本量大、反應(yīng)體系穩(wěn)定,適合進行大批量或需要長時間監(jiān)測的實驗。
3、自動化集成:儀器背部的自動進樣器接口(可選配)允許其與液體處理工作站連接,實現(xiàn)無人值守的自動化樣本加樣和連續(xù)上機檢測,這本身就要求儀器能夠24/7穩(wěn)定工作。
二、伯樂CFX Opus Deepwell實時熒光定量PCR儀軟件和控制支持
1、CFX Maestro軟件:配套的軟件可以創(chuàng)建和運行長達數(shù)天的實驗Protocol。您可以輕松設(shè)置包含多個溫度循環(huán)、長時間保溫或周期性檢測的程序。
2、遠程監(jiān)控:通過網(wǎng)絡(luò)連接的儀器,用戶可以在辦公室甚至家中遠程查看實驗進度、預(yù)覽數(shù)據(jù),無需一直守在儀器旁。
三、運行24小時需要考慮的實際因素
1、實驗方案合理性:確保您的PCR循環(huán)數(shù)、孵育時間等加起來在24小時以內(nèi)是科學(xué)必要的。標(biāo)準的qPCR反應(yīng)通常在1-2小時內(nèi)完成,長達24小時的運行通常用于一些特殊應(yīng)用,例如:
(1)極低起始拷貝數(shù)的慢速擴增。
(2)需要長時間孵育的等溫擴增檢測。
(3)連續(xù)監(jiān)測細胞基因表達變化的特殊實驗(但qPCR通常不用于實時監(jiān)測活細胞)。
(4)在一天內(nèi)自動連續(xù)運行多塊板(如每2小時一塊,共12塊板)。
2、儀器放置環(huán)境:
(1)電源穩(wěn)定性:必須連接不間斷電源(UPS),防止意外斷電導(dǎo)致實驗中斷和數(shù)據(jù)丟失。
(2)散熱空間:確保儀器周圍有足夠的散熱空間,通風(fēng)口不被堵塞。長時間運行會產(chǎn)生熱量,良好的散熱是保障儀器壽命和結(jié)果穩(wěn)定性的關(guān)鍵。
(3)環(huán)境溫度:在實驗室推薦的溫度(通常15-30°C)和濕度環(huán)境下運行。
3、板子和密封:
(1)使用高質(zhì)量的密封膜或光學(xué)蓋。對于長達24小時的運行,密封性至關(guān)重要,以防止反應(yīng)體系蒸發(fā),這會導(dǎo)致孔間體積差異,影響熒光讀數(shù)和定量準確性。
(2)深孔板比普通板蒸發(fā)更慢,但長期實驗仍需重視密封。
四、總結(jié)與建議
Bio-Rad CFX Opus Deepwell系統(tǒng)有能力安全、穩(wěn)定地運行24小時甚至更長時間。
在操作前,請做好以下準備:
1、驗證實驗方案:確認長達24小時的運行時間是實驗所必需的。
2、檢查實驗室基礎(chǔ)設(shè)施:穩(wěn)定的電源(強烈推薦UPS)、良好的通風(fēng)和適宜的環(huán)境溫度。
3、使用可靠的耗材:選擇高質(zhì)量、密封性好的深孔板和封板膜。
4、提前測試:如果可能,進行一個短時間的預(yù)實驗,驗證整個流程(包括程序設(shè)置、板子密封等)。
5、查看用戶手冊:查閱儀器隨附的手冊,了解關(guān)于長時間運行的具體注意事項。