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技術文章

eppendorf艾本德5702R臺式冷凍微量離心機使用案例介紹

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艾本德 Eppendorf 5702 R 是一款非常經典和可靠的冷凍型微量臺式高速離心機。它在分子生物學、細胞生物學、生物化學等實驗室中應用極為廣泛。以下將通過幾個典型的使用案例來詳細介紹其操作流程、關鍵技巧和注意事項,幫助您更直觀地掌握其應用。


一、艾本德5702R冷凍離心機乙醇沉淀后DNA/RNA的回收(常用場景)

1、準備工作:

將需要離心的 1.5 mL 或 2.0 mL 微量離心管(內含核酸與醇的混合液)在室溫平衡片刻,以減少溫差。

確保離心機已接通電源,制冷系統已開啟(建議提前15分鐘開機預冷)。

準備適配的轉子:例如 FA-45-30-11 轉子(用于 2.0/1.5 mL 管,MAX 15,000 rpm)。

2、操作流程:

打開蓋子: 按下正面按鈕打開離心機門。

(1)放置轉子與平衡:

檢查轉子是否已穩妥安裝在電機軸上。

嚴格進行配平! 將含有樣品的管子對稱放置。如果樣品數是單數,必須用一管裝有等體積水或緩沖液的管子作為平衡管。

確保所有管蓋蓋緊,并且管蓋方向一致(建議管蓋朝外朝向轉子中心,以免高速旋轉時蓋子意外彈開)。

(2)參數設置:

關閉機蓋。

在控制面板上設置:

溫度: +4°C。低溫有助于沉淀,并防止核酸降解(尤其是RNA)。

轉速/離心力: ≥ 12,000 rpm 或 ≥ 12,000 xg。

時間: 15-30分鐘。

按下 “Start" 鍵。儀器會先加速至設定轉速,并保持溫度。

(3)運行結束

運行結束后會發出蜂鳴聲,轉子緩慢停止。

等待轉子停止后,再按下開門鍵打開機蓋。

小心取出樣品管,輕輕倒掉上清(管底的白色沉淀即為核酸沉淀)。

進行后續的70%乙醇洗滌和干燥步驟。


二、艾本德5702R冷凍離心機快速收集細胞或細菌沉淀

實驗目的: 將液體培養基中的哺乳動物細胞或細菌通過離心快速收集到管底。

1、準備工作:

樣品為裝有細胞懸液的 1.5 mL 離心管。

轉子同上。

2、操作流程:

平衡并裝載樣品管。

參數設置:

溫度: +4°C(保持細胞活性,防止蛋白降解)或 室溫(對于細菌)。

轉速/離心力: 根據樣本類型設定。

真核細胞: 通常 300 - 500 xg, 5-10分鐘。避免高速破壞細胞。

大腸桿菌等細菌: 8,000 - 12,000 xg, 1-2分鐘。

啟動離心。

結束后,可見管底有清晰的細胞/細菌沉淀塊,小心吸棄上清。


三、艾本德5702R冷凍離心機小體積樣品的“瞬離"

實驗目的: 將PCR管壁或管蓋上的液體甩至管底,或使反應體系混合均勻。

1、準備工作:

使用 PCR 條管或單個 0.2 mL PCR 管。

更換適配的轉子:例如 A-2-DWP 轉子(用于 PCR 排管)或帶有適配器的轉子。

2、操作流程:

將PCR管放入適配器中并對稱平衡。

參數設置:

溫度: 通常設為 室溫 或直接使用 “Short Spin" 功能(瞬離按鈕)。

轉速/離心力: 6,000 - 10,000 rpm。

時間: 10 - 30秒。時間極短,因此無需開啟制冷(制冷系統來不及響應)。

按下“Start"鍵,瞬間完成。

立即取出使用。


四、艾本德5702R冷凍離心機在不同溫度下進行蛋白沉淀

實驗目的: 使用TCA/丙酮等方法沉淀蛋白質。

1、準備工作:

樣品為蛋白溶液與沉淀劑的混合液。

根據實驗方案要求,可能需要室溫或低溫沉淀。

2、操作流程:

裝載并平衡樣品。

參數設置:

方案一(低溫沉淀): 溫度設為 +4°C, 轉速 14,000 - 15,000 xg, 時間 15-20分鐘。可提高沉淀效率,減少蛋白降解。

方案二(室溫沉淀): 溫度設為 +20°C 或關閉制冷,其他參數類似。

結束后,小心移除上清,收集蛋白沉淀。


總結: Eppendorf 5702 R是一款精密儀器,其核心在于 “平衡、合適的轉子、正確的溫控和離心參數" 。通過上述案例,您可以看到它在幾乎所有涉及微量樣品處理的實驗步驟中都是工具。養成良好的操作習慣,能極大延長儀器壽命并保證實驗結果的重復性。

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