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技術(shù)文章

Eppendorf艾本德電動(dòng)移液器校準(zhǔn)步驟流程

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艾本德(Eppendorf)電動(dòng)移液器的校準(zhǔn)是一項(xiàng)需要嚴(yán)格按照規(guī)范操作的精密工作。建議由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的專(zhuān)業(yè)人員或在廠(chǎng)家工程師指導(dǎo)下進(jìn)行。在校準(zhǔn)前,請(qǐng)務(wù)必詳細(xì)閱讀您移液器型號(hào)的用戶(hù)手冊(cè),因?yàn)椴煌吞?hào)(如 Eppendorf Xplorer / Research plus 電動(dòng)型、Eppendorf E3/E4 等)的操作細(xì)節(jié)可能略有不同。

以下提供一套適用于大多數(shù)艾本德電動(dòng)移液器的通用校準(zhǔn)步驟流程,它基于標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量測(cè)定法(也稱(chēng)“稱(chēng)重法")。


一、艾本德電動(dòng)移液器校準(zhǔn)原則與準(zhǔn)備

1、校準(zhǔn)環(huán)境:在無(wú)風(fēng)、穩(wěn)定的臺(tái)面進(jìn)行,環(huán)境溫度穩(wěn)定在20-25°C為佳(溫度波動(dòng)<0.5°C/h),相對(duì)濕度50%以上(防止蒸發(fā)過(guò)快)。

2、設(shè)備與試劑:

(1)待校準(zhǔn)的艾本德電動(dòng)移液器

(2)經(jīng)過(guò)計(jì)量認(rèn)證的分析天平(精度至少為移液器最小分度值對(duì)應(yīng)質(zhì)量的0.1%,如校準(zhǔn)10μl量程,需精度達(dá)0.001g的百萬(wàn)分之一天平)

(3)經(jīng)認(rèn)證的溫度計(jì)和濕度計(jì)

(4)校準(zhǔn)用純水:高純度去離子水(電阻率≥10 MΩ·cm),提前與水、移液器、吸頭、天平在同一環(huán)境下平衡至少2小時(shí)。

(5)匹配的、高質(zhì)量的吸頭:推薦使用Eppendorf原裝吸頭。

(6)稱(chēng)量容器(如小燒杯)。

3、安全:遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。


二、艾本德電動(dòng)移液器標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)流程

整個(gè)流程可概括為:測(cè)試當(dāng)前性能 → 判斷是否合格 → 如不合格則進(jìn)行內(nèi)部校準(zhǔn)(Adjustment) → 再次驗(yàn)證。

A、性能測(cè)試

1、設(shè)置目標(biāo)體積:在移液器上設(shè)置需要校準(zhǔn)的體積點(diǎn)。通常至少選擇三個(gè)點(diǎn):量程上限(100%)、中間點(diǎn)(約50%)和量程下限(10%或最小量程)。例如,對(duì)于100-1000μl的移液器,可選擇1000μl、500μl和100μl。

2、準(zhǔn)備天平與記錄表:打開(kāi)天平,調(diào)零。準(zhǔn)備好記錄表,記錄環(huán)境溫度、濕度、水的密度等。

3、預(yù)潤(rùn)濕:裝上吸頭,吸取并排空校準(zhǔn)用水3-5次,使吸頭內(nèi)壁形成穩(wěn)定的液膜,減少誤差。

4、重操作:

(1)將稱(chēng)量容器放在天平上,去皮歸零。

(2)使用移液器小心吸取目標(biāo)體積的純水。

(3)以推薦的移液模式(通常為“常規(guī)模式")將水排入稱(chēng)量容器。

(4)注意排液技巧:對(duì)于大部分移液器,應(yīng)將吸頭頂部靠在容器內(nèi)壁,緩慢、穩(wěn)定地按下排液鍵到底,停留一秒后,沿壁滑出。

(5)記錄天平顯示的穩(wěn)定讀數(shù)(質(zhì)量m,單位g)。

5、重復(fù)測(cè)量:對(duì)每個(gè)體積點(diǎn)重復(fù)測(cè)量10次。每次更換新吸頭,并重復(fù)預(yù)潤(rùn)濕步驟。

6、與標(biāo)準(zhǔn)比較:

將計(jì)算出的系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差,與移液器商家聲明的允許誤差限進(jìn)行比較。艾本德的允許誤差通常遵循ISO 8655或自定更嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。


B、判斷與決策

1、如果兩項(xiàng)誤差均在允許范圍內(nèi) → 移液器性能合格,無(wú)需調(diào)整,出具校準(zhǔn)報(bào)告即可。

2、如果任一項(xiàng)誤差超出允許范圍 → 移液器需要內(nèi)部校準(zhǔn)(即調(diào)整其內(nèi)部參數(shù))。


C、內(nèi)部校準(zhǔn)

這是制造商對(duì)“校準(zhǔn)"的專(zhuān)業(yè)定義,用戶(hù)通常稱(chēng)之為“校正"或“調(diào)校"。必須在性能測(cè)試不合格后進(jìn)行。

通用流程如下:

1、進(jìn)入校準(zhǔn)模式:

通常需要關(guān)機(jī),然后按住特定按鍵(如“排液鍵"或“ eject鍵")的同時(shí)開(kāi)機(jī),或通過(guò)菜單(Settings -> Service -> Calibration)進(jìn)入。請(qǐng)務(wù)必查閱手冊(cè)!

2、選擇校準(zhǔn)體積點(diǎn):系統(tǒng)通常會(huì)提示你校準(zhǔn)幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)(如大、小體積)。

3、執(zhí)行校準(zhǔn):

(1)系統(tǒng)會(huì)提示你“吸取"一個(gè)參考值(可能是空氣,或要求你連接一個(gè)校準(zhǔn)工具模擬負(fù)載)。

(2)對(duì)于需要真實(shí)體積校準(zhǔn)的型號(hào),你需要使用一把已校準(zhǔn)好的、精度更高的參考移液器,或者按照屏幕提示,使用剛才稱(chēng)重法測(cè)得的實(shí)際平均值作為輸入。

(3)根據(jù)移液器提示,輸入目標(biāo)值(即你希望移液器達(dá)到的精確體積)。

(4)移液器內(nèi)部電機(jī)會(huì)自動(dòng)調(diào)整其活塞行程的步進(jìn)數(shù),從而改變吸取體積。

4、保存并退出:完成所有點(diǎn)的調(diào)整后,保存新參數(shù),退出校準(zhǔn)模式。


D、校準(zhǔn)后驗(yàn)證

完成內(nèi)部校準(zhǔn)后,必須重新執(zhí)行一步“性能測(cè)試"的全部流程,以驗(yàn)證調(diào)整后的移液器誤差是否已回到允許范圍內(nèi)。


E、文件化

記錄所有數(shù)據(jù)、環(huán)境條件、操作人員、日期,并貼上清晰的校準(zhǔn)狀態(tài)標(biāo)簽(注明下次校準(zhǔn)日期)。


三、重要建議

1、專(zhuān)業(yè)服務(wù):對(duì)于實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制(GLP/GMP)或關(guān)鍵應(yīng)用,建議將移液器送至艾本德的計(jì)量服務(wù)中心或具備資質(zhì)的第三方機(jī)構(gòu)進(jìn)行校準(zhǔn)。他們有更專(zhuān)業(yè)的設(shè)備、環(huán)境和認(rèn)證流程。

2、定期進(jìn)行:根據(jù)使用頻率,通常每6-12個(gè)月應(yīng)進(jìn)行一次校準(zhǔn)。日常使用中應(yīng)每月進(jìn)行快速的功能檢查。

3、軟件輔助:使用艾本德的移液器校準(zhǔn)/管理軟件(如“Eppendorf Pipette Calibration"),可以極大簡(jiǎn)化Z值計(jì)算、數(shù)據(jù)記錄和報(bào)告生成。

TEL:18016231680

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